QuickEasyᵀᴹ זמן אמת PCR Kit-Taqman
תיאור ערכה:
◮מערכת אופטימיזציית PCR הייחודית הופכת את 2×QuickEasyTMReal PCR Mix-Taqman תואם יותר.
◮Hot-start Foregene HS Taq Polymerase הוא בעל יעילות הגברה גבוהה יותר, רגישות הגברה גבוהה יותר וסגוליות הגברה גבוהה יותר.
◮2× QuickEasyTMReal PCR Mix -Taqman משתמש במערכת ייחודית שעברה אופטימיזציה על ידי Foregene כדי לשפר את הרגישות והספציפיות של זיהוי בדיקה ספציפית לרצף, אשר ניתן להשתמש בה לקביעת גנוטיפ וקביעת וריאציות של מספר העתקות ולקבל תוצאות מדויקות.
◮מוצר זה מגיע עם צבע התייחסות פנימי ROX, שניתן להשתמש בו כדי לחסל רקע אות ושגיאות אות בין בארות, מה שנוח לשימוש ללקוחות בסוגים שונים של מכשירי PCR כמותיים.
תיאורים
ה-2× QuickEasyTMReal PCR Mix-Taqman מסופק על ידי QuickEasyTMערכת Real Time PCR Kit-Taqman היא מערכת מיקס מאסטר מהדור החדש המיועדת לתגובת הגברה בזמן אמת של PCR באמצעות בדיקות פלורסנט ספציפיות.הליבה של Foregene HS Taq DNA Polymerase מבוססת על שינוי נוגדנים, בשימוש בשילוב עם מערכת PCR אופטימלית נוספת של Foregene, בעלת ספציפיות גבוהה יותר ויעילות הגברה.בהשוואה לתערובת PCR רגילה, יש לו יכולת הגברה חזקה יותר ושיעור אי-התאמה נמוך יותר.זה יכול לשמש בתגובת PCR כמותית פלואורסצנטית כדי להפחית הגברה לא ספציפית ולשפר את הדיוק של PCR.זה יכול לשפר מאוד את סגוליות המוצר ורגישות התגובה.במקביל, ROX סופק כצבע ייחוס פנימי.
ה-QuickEasyTMערכת Real Time PCR Kit-Taqman היא בעלת טווח יישום רחב לכמות התבנית, והיא יכולה להשיג עקומת תקן טובה באזורים כמותיים שונים, ויכולה לכמת ולזהות במדויק גני מטרה עם חזרה טובה וביטחון גבוה.
מפרטים
200 הכנות,500 הכנות,1000 הכנות,2000 הכנות
רכיבי ערכה
| QuickEasyTMערכת PCR בזמן אמת-תקמן(20μlמערכת) | ||||
| תכולת ערכה | QP-01121 | QP-01122 | QP-01123 | QP-01124 |
| 200 הכנות | 500 הכנות | 1000 הכנות | 2000 הכנות | |
| 2×מָהִירקַלTM PCR אמיתי לְעַרְבֵּב-טקמן | 1 מ"ל×2 | 1.7 מ"ל×3 | 1.7 מ"ל×6 | 1.7 מ"ל×12 |
| 20×ROX Reference Dye | 200μL | 0.5 מ"ל | 1 מ"ל | 1 מ"ל×2 |
| ddH ללא DNase2O | 1.7 מ"ל | 1.7 מ"ל×2 | 10 מ"ל | 20 מ"ל |
| אם אתה | 1לְחַבֵּר | 1לְחַבֵּר | 1לְחַבֵּר | 1לְחַבֵּר |
תכונות ויתרונות
■ מערכת אופטימיזציית PCR הייחודית הופכת את 2×QuickEasyTMReal PCR Mix-Taqman תואם יותר.
■ Hot-start Foregene HS Taq Polymerase בעל יעילות הגברה גבוהה יותר, רגישות הגברה גבוהה יותר וסגוליות הגברה גבוהה יותר.
■ 2× QuickEasyTM Real PCR Mix -Taqman משתמש במערכת ייחודית שעברה אופטימיזציה על ידי Foregene כדי לשפר את הרגישות והספציפיות של זיהוי בדיקה ספציפית לרצף, אשר ניתן להשתמש בה לקביעת גנוטיפ וקביעת וריאציות של מספר העתקות ולקבל תוצאות מדויקות.
■ מוצר זה מגיע עם צבע התייחסות פנימי ROX, שניתן להשתמש בו כדי לחסל רקע אות ושגיאות אות בין בארות, דבר שנוח לשימוש ללקוחות בסוגים שונים של מכשירי PCR כמותיים.
יישום ערכה
■ PCR כמותי פלואורסצנטי לניתוח כמותי של תבנית;
■ גהגברה רגילה של PCR;
■ ניתן להשתמש לזיהוי אללים.
אחסון וחיי מדף
יש לאחסן את הערכה ב-20 מעלות צלזיוס בחושך;אם נעשה בו שימוש תכוף, ניתן לאחסן אותו גם ב-4 מעלות צלזיוס לפרק זמן קצר (השתמש בו תוך 10 ימים).
עקרונות עיצוב פריימר בזמן אמת PCR
פריימר קדימה ופרימר לאחור
עבור PCR בזמן אמת, עיצוב פריימר חשוב מאוד.פריימרים קשורים לספציפיות וליעילות של הגברה של PCR, וניתן לעצב אותם תוך התייחסות לעקרונות הבאים:
אורך פריימר: 18-30bp.
תכולת GC: 40-60%.
ערך Tm: תוכנת עיצוב פריימר, כמו Primer 5, יכולה לתת את ערך ה-Tm של הפריימר.ערכי ה-Tm של הפריימרים במעלה הזרם והמורד הזרם צריכים להיות קרובים ככל האפשר.ניתן להשתמש גם בנוסחת חישוב Tm: Tm = 4°C (G + C) + 2°C (A + T).בעת ביצוע PCR, טמפרטורה מתחת לערך ה-primer Tm של 5 מעלות צלזיוס נבחרת בדרך כלל כטמפרטורת החישול (העלייה המקבילה בטמפרטורת החישול יכולה להגביר את הספציפיות של תגובת ה-PCR).
פריימרים ומוצרי PCR:
אורך המוצר להגברת PCR של פריימר עיצוב הוא רצוי 100-150bp.
יש להימנע ככל האפשר מפריי תכנון באזור המבני המשני של התבנית.
הימנע מהיווצרות של 2 או יותר בסיסים משלימים בין קצוות 3′ של פריימרים במעלה הזרם ומורד הזרם.
בסיס מסוף פריימר 3′ לא יכול להיות קיים עם 3 נוספים G או C רצופים.
לפריימרים עצמם לא יכולים להיות מבנים משלימים, אחרת יווצר מבנה סיכת ראש, המשפיע על הגברה של PCR.
יש לפזר את ATCG בצורה שווה ככל האפשר ברצף ה-primer, ויש להימנע מהבסיס המסוף של 3′ כ-T.
נספח 1: חבילת תוספת רכיבי ערכת Cell Direct RT-qPCR
1.תמיסת ליטוש תאים
|
| |||
| רכיבי ערכה (מערכת תמוגה / באר 24 באר) | DRT-01011-A1 | DRT-01011-A2 | |
| 100 T | 500 T | ||
| חֵלֶקאני | Buffer CL | 20 מ"ל | 100 מ"ל |
| Foregene Protease Plus II | 400 μl | 1 מ"ל × 2 | |
| Buffer ST | 1 מ"ל × 2 | 10 מ"ל | |
| חֵלֶקII | מחק DNA | 400 μl | 1 מ"ל × 2 |
2.RT מיקס
|
| |
| רכיבי ערכה (מערכת תגובה של 20 μl) | DRT-01011-B1 |
| 200 T | |
| 5× Direct RT Mix | 800 μl |
| ddH ללא RNase2O | 1.7 מ"ל × 2 |
|
| ||
| רכיבי ערכה (מערכת תגובה של 20 μl) | DRT-01011-C1 | DRT-01011-C2 |
| 200 T | 1000 T | |
| 2× Direct qPCR Mix-SYBR | 1 מ"ל × 2 | 1.7 מ"ל × 6 |
| 50× ROX Reference Dye | 40 μl | 200 μl |
| ddH ללא RNase2O | 1.7 מ"ל | 10 מ"ל |
