Zebra Fish Direct PCR Kit-UNG Direct PCR Lysis Reagent (דג זברה)
תיאור ערכה:
שימוש ישיר בליזאט של דג הזברה כתבנית להגברת PCR, ללא מיצוי נפרד של DNA, רגישות מהירה וגבוהה.נוספה מערכת נגד זיהום UNG כדי לחסל תוצאות חיוביות כוזבות.
◮לא נדרש טיהור DNA שגוזל זמן ויקר.
◮הביקוש לדוגמא קטן, פשוט קח זרע בודד.
◮אין צורך בטיפולים מיוחדים כמו גריסה וריסוק והתפעול פשוט.
◮מערכת ה-PCR האופטימלית מאפשרת ל-PCR סגוליות גבוהה יותר וסבילות חזקה יותר למעכבי תגובת PCR.
תיאורים
ערכה זו משתמשת במערכת חיץ תמוגה ייחודית לשחרור מהיר של DNA גנומי מרקמות דגי זברה ורקמות אחרות של דגי מים מתוקים, סנפירי זנב או ביצי דגים לתגובות PCR, כך שהיא מתאימה במיוחד לבדיקות גנטיות בקנה מידה גדול.תהליך שחרור ה-DNA הגנומי ממאגר התמוגה מסתיים תוך 10-30 דקות ב-65 מעלות צלזיוס.אין צורך בתהליכים אחרים כגון הסרת חלבון ו-RNA, וניתן להשתמש ב-DNA העקבות המשוחרר כתבנית לתגובת PCR.
2× PCR EasyTM Mix (UNG) משתמש ב-dUTP במקום dTTP על בסיס 2× PCR EasyTM Mix, ומוסיף אנזים UNG (Uracil-N-glycosylase) שיכול לפרק את התבנית המכילה dUTP בו-זמנית.לפני תגובת ה-PCR, נעשה שימוש באנזים UNG לפירוק תוצר ה-PCR המכיל אורציל.לאנזים UNG לא תהיה כל השפעה על התבנית שאינה מכילה אורציל, ובכך יבטיח את הספציפיות והדיוק של ההגברה וימנע את האפשרות של בדיקות גנטיות בקנה מידה גדול.התרחש זיהום של מוצרי PCR.
D-Taq DNA פולימראז הוא פולימראז DNA שפותח במיוחד על ידי Foregene לתגובות PCR ישירות.ל-D-Taq DNA פולימראז יש סבילות חזקה למגוון מעכבי תגובת PCR, והוא יכול להגביר ביעילות כמויות עקבות של DNA במערכות תגובה מורכבות שונות, ומהירות ההגברה יכולה להגיע ל-2Kb/min, מה שמתאים במיוחד לתגובת PCR ישירה.
מפרטים
50×20µl rxns, 200×20µl rxns, 500×20µl rxns, 2000×20µl rxns
רכיבי ערכה
| חלק א' | Buffer FP |
| Foregene Protease | |
| 6× מאגר טעינת DNA | |
| חלק שני | 2×PCR קלTMמיקס (UNG) |
| הוראות | |
תכונות ויתרונות
■ אין צורך בטיהור DNA שגוזל זמן ויקר.
■ הביקוש לדגימה קטן, ניתן לבדוק רק 1 מ"ג סנפיר זנב דגים או 10 ביצי דגים.
■ אין צורך בטיפולים מיוחדים כמו טחינה וריסוק והתפעול פשוט.
■ מערכת PCR נגד זיהום 2× PCR EasyTM Mix (UNG), שיכולה לחסל ביעילות את הזיהום הנגרם על ידי מוצרי PCR ולהבטיח את הספציפיות והדיוק של ההגברה.
■ מערכת PCR אופטימלית גורמת ל-PCR סגוליות גבוהה יותר וסובלנות חזקה יותר למעכבי תגובה PCR.
פרמטרים של ערכה
יישום: דגי זברה ודגי מים מתוקים אחרים.
DNA ששוחרר מתמוגגת דגימה: משמש רק כתבנית PCR.
ניתן להשתמש בערכה למטרות הבאות: זיהוי טרנסגנוזיס, גנוטיפ של בעלי חיים וכו'.
זרימת עבודה
אחסון וחיי מדף
יש לאחסן את חלק I של ערכה זו בטמפרטורה של 2-8℃.
ניתן לאחסן את המגיב Buffer FP למשך 12 חודשים בתנאים יבשים;ניתן לאחסן אותו ב-2-8℃ לאחסון ארוך יותר.
v Reagent Foregene Protease יש נוסחה ייחודית.כדי להבטיח את פעילותו ויציבותו, נא לאחסן אותו בטמפרטורה של 4℃ למשך 12 חודשים.
ניתן לאחסן מאגר טעינת vReagent 6×DNA בטמפרטורה של 4℃ או -20℃ למשך זמן רב.
יש לאחסן את חלק II של ערכה זו ב-20℃.
vReagent 2×PCR EasyTM Mix(UNG), אם נעשה בו שימוש תכוף, ניתן לאחסן אותו גם בטמפרטורה של 4℃ לאחסון לטווח קצר (השתמשו בו תוך 10 ימים).
