ערכת EndoFree Maxi Plasmid (עמודת ספין)
תיאור ערכה:
כל תהליך החילוץ אורך שעה אחת בלבד, מה שמבטיח את הפעולה הנוחה והמהירה.
תיאור
ערכת EndoFree Maxi Plasmid מאמצת טכניקת ספיחת קרום סיליקה ייחודית לקשירת DNA פלסמיד ביעילות ובאופן ספציפי.על ידי שילוב ה-Endotoksin Removal Buffer P4 ו-EndoFree Maxi Filtration Columns, ניתן להסיר ביעילות אנדוטוקסין, חלבונים וזיהומים אחרים.כל תהליך החילוץ אורך שעה אחת בלבד, מה שמבטיח את הפעולה הנוחה והמהירה.
כמות חיידקים מומלצת לכל תרגול: עבור פלסמיד בעותק גבוה, מומלץ להשתמש ב-100 מ"ל של מדיית תרבית חיידקים, והתשואה ממנה היא בדרך כלל סביב 500-1500 מיקרוגרם.עבור פלסמיד בעותק נמוך, מדיה לתרבות חיידקים בנפח 200 מ"ל מומלצת ליצור סביב 200-600 מיקרוגרם פלסמידים.
רכיבי ערכה
| מוצר רכיבים | D909-E（10 הכנות） |
| מאגר BL | 30 מ"ל |
| מאגר P1 | 100 מ"ל |
| מאגר P2 | 100 מ"ל |
| מאגר P4 | 100 מ"ל |
| מאגר DW2 | 44 מ"ל |
| Buffer EB | 30 מ"ל |
| RNase A (10 מ"ג/מ"ל) | 1 מ"ל |
| עמודות DNAPure Maxi Spin | 10 יחידות |
| מזרק מסנן FinePure Maxi | 10 יחידות |
| צינורות איסוף 50 מ"ל | 10 יחידות |
זיהוי ריכוז וטוהר DNA של פלסמיד
ניתן לזהות את הטוהר והריכוז של ה-DNA הפלסמיד המופק על ידי אלקטרופורזה של ג'ל אגרוז וספקטרופוטומטר אולטרה סגול.ערך OD260 של 1 מתאים לכ-50 מיקרוגרם/מ"ל של DNA כפול גדילים.ערך OD260/OD280 של ה-DNA הפלסמיד המטוהר הוא בדרך כלל בטווח של 1.7-1.9.ניתן ליישם את ה-DNA הפלסמיד המטוהר ישירות על ניסויים עם דרישות טוהר גבוהות, כגון טרנספקציה של תאים או ניסויים in vivo.
יישום ערכה
ניתן ליישם את ה-DNA הפלסמיד המופק על ידי ערכה זו בפעולות שגרתיות שונות, כולל עיכול אנזימטי, PCR, רצף, קשירה, טרנספורמציה וכן טרנספקציה לסוגי תאים שונים.
אחסון וחיי מדף
EndoFree Maxi Plasmid Kit ניתן לאחסן בטמפרטורת החדר (15-25 מעלות צלזיוס) בתנאים יבשים עד 12 חודשים.הוסף RNase A למאגר P1 לפני השימוש הראשון, ערבב היטב ואחסן בטמפרטורה של 2-8 מעלות צלזיוס.ניתן לאחסן את התערובת ביציבות במשך יותר מ-6 חודשים.
