מפעל OEM עבור High Fidelity Rt-Qpcr 2X שילוב רב-שלבי רב-שלבי מאסטר
מצוין מלכתחילה, ו-Consumer Supreme הוא הקו המנחה שלנו לספק את השירותים המובילים לקונים שלנו. בימים אלה, אנו מנסים כמיטב יכולתנו להיות בין היצואנים המובילים בתעשייה שלנו כדי לענות על הקונים הדרושים הרבה יותר עבור OEM Factory for High Fidelity Rt-Qpcr 2X One-Step Multiplex Master Mix.
מצוין מלכתחילה, ו-Consumer Supreme הוא הקו המנחה שלנו לספק את השירותים המובילים לקונים שלנו. בימים אלה, אנו מנסים כמיטב יכולתנו להיות בין היצואנים המובילים בתעשייה שלנו כדי לענות על צורך רב יותר לקוניםChina Taq DNA Polymerase ו-Qpcr, עם השירות המעולה והיוצא מן הכלל, אנחנו מפותחים היטב יחד עם הלקוחות שלנו.מומחיות וידע מבטיחים שאנו נהנים תמיד מאמון הלקוחות שלנו בפעילות העסקית שלנו."איכות", "יושר" ו"שירות" הוא העיקרון שלנו.הנאמנות והמחויבויות שלנו נשארות לשירותך בכבוד.צור קשר היום למידע נוסף, צור איתנו קשר עכשיו.
עקרונות עיצוב פריימר בזמן אמת PCR
פריימר קדימה ופרימר לאחור
עבור PCR בזמן אמת, עיצוב פריימר חשוב מאוד.פריימרים קשורים לספציפיות וליעילות של הגברה של PCR, וניתן לעצב אותם תוך התייחסות לעקרונות הבאים:
- אורך פריימר: 18-30bp.
- תכולת GC: 40-60%.
- ערך Tm: תוכנת עיצוב פריימר, כמו Primer 5, יכולה לתת את ערך ה-Tm של הפריימר.ערכי ה-Tm של הפריימרים במעלה הזרם והמורד הזרם צריכים להיות קרובים ככל האפשר.ניתן להשתמש גם בנוסחת חישוב Tm: Tm = 4°C (G + C) + 2°C (A + T).בעת ביצוע PCR, טמפרטורה מתחת לערך ה-primer Tm של 5 מעלות צלזיוס נבחרת בדרך כלל כטמפרטורת החישול (העלייה המקבילה בטמפרטורת החישול יכולה להגביר את הספציפיות של תגובת ה-PCR).
- פריימרים ומוצרי PCR:
- אורך המוצר להגברת PCR של פריימר עיצוב הוא רצוי 100-150bp.
- יש להימנע ככל האפשר מפריי תכנון באזור המבני המשני של התבנית.
- הימנע מהיווצרות של 2 או יותר בסיסים משלימים בין קצוות 3′ של פריימרים במעלה הזרם ומורד הזרם.
- בסיס מסוף פריימר 3′ לא יכול להיות קיים עם 3 נוספים G או C רצופים.
- לפריימרים עצמם לא יכולים להיות מבנים משלימים, אחרת יווצר מבנה סיכת ראש, המשפיע על הגברה של PCR.
- יש לפזר את ATCG בצורה שווה ככל האפשר ברצף ה-primer, ויש להימנע מהבסיס המסוף של 3′ כ-T.
נִספָּח1: גell ישירRT-qPCR רכיב ערכהחבילת תוספת לא
1. פתרון תמיסת תאים
תמיסת ליטוש תאים | |||
רכיבי ערכה (מערכת תמוגה / באר 24 באר) | DRT-01011-A1 | DRT-01011-A2 | |
100 T | 500 T | ||
חֵלֶקאני | Buffer CL | 20 מ"ל | 100 מ"ל |
Foregene Protease Plus II | 400 μl | 1 מ"ל × 2 | |
Buffer ST | 1 מ"ל × 2 | 10 מ"ל | |
חֵלֶקII | מחק DNA | 400 μl | 1 מ"ל × 2 |
RT Mix | |
רכיבי ערכה (מערכת תגובה של 20 μl) | DRT-01011-B1 |
200 T | |
5× Direct RT Mix | 800 μl |
ddH ללא RNase2O | 1.7 מ"ל × 2 |
מיקס qPCR | ||
רכיבי ערכה (מערכת תגובה של 20 μl) | DRT-01021-C1 | DRT-01021-C2 |
200 T | 1000 T | |
2× Direct qPCR Mix-Taqman | 1 מ"ל × 2 | 1.7 מ"ל × 6 |
20× ROX Reference Dye | 40 μl | 200 μl |
ddH ללא RNase2O | 1.7 מ"ל | 10 מ"ל |
מצוין מלכתחילה, ו-Consumer Supreme הוא הקו המנחה שלנו לספק את השירותים המובילים לקונים שלנו. בימים אלה, אנו מנסים כמיטב יכולתנו להיות בין היצואנים המובילים בתעשייה שלנו כדי לענות על הקונים הדרושים הרבה יותר עבור OEM Factory for High Fidelity Rt-Qpcr 2X One-Step Multiplex Master Mix.
OEM מפעל עבורChina Taq DNA Polymerase ו-Qpcr, עם השירות המעולה והיוצא מן הכלל, אנחנו מפותחים היטב יחד עם הלקוחות שלנו.מומחיות וידע מבטיחים שאנו נהנים תמיד מאמון הלקוחות שלנו בפעילות העסקית שלנו."איכות", "יושר" ו"שירות" הוא העיקרון שלנו.הנאמנות והמחויבויות שלנו נשארות לשירותך בכבוד.צור קשר היום למידע נוסף, צור איתנו קשר עכשיו.
עקרונות עיצוב פריימר בזמן אמת PCR
פריימר קדימה ופרימר לאחור
עבור PCR בזמן אמת, עיצוב פריימר חשוב מאוד.פריימרים קשורים לספציפיות וליעילות של הגברה של PCR, וניתן לעצב אותם תוך התייחסות לעקרונות הבאים:
- אורך פריימר: 18-30bp.
- תכולת GC: 40-60%.
- ערך Tm: תוכנת עיצוב פריימר, כמו Primer 5, יכולה לתת את ערך ה-Tm של הפריימר.ערכי ה-Tm של הפריימרים במעלה הזרם והמורד הזרם צריכים להיות קרובים ככל האפשר.ניתן להשתמש גם בנוסחת חישוב Tm: Tm = 4°C (G + C) + 2°C (A + T).בעת ביצוע PCR, טמפרטורה מתחת לערך ה-primer Tm של 5 מעלות צלזיוס נבחרת בדרך כלל כטמפרטורת החישול (העלייה המקבילה בטמפרטורת החישול יכולה להגביר את הספציפיות של תגובת ה-PCR).
- פריימרים ומוצרי PCR:
- אורך המוצר להגברת PCR של פריימר עיצוב הוא רצוי 100-150bp.
- יש להימנע ככל האפשר מפריי תכנון באזור המבני המשני של התבנית.
- הימנע מהיווצרות של 2 או יותר בסיסים משלימים בין קצוות 3′ של פריימרים במעלה הזרם ומורד הזרם.
- בסיס מסוף פריימר 3′ לא יכול להיות קיים עם 3 נוספים G או C רצופים.
- לפריימרים עצמם לא יכולים להיות מבנים משלימים, אחרת יווצר מבנה סיכת ראש, המשפיע על הגברה של PCR.
- יש לפזר את ATCG בצורה שווה ככל האפשר ברצף ה-primer, ויש להימנע מהבסיס המסוף של 3′ כ-T.
נִספָּח1: גell ישירRT-qPCR רכיב ערכהחבילת תוספת לא
1. פתרון תמיסת תאים
תמיסת ליטוש תאים | |||
רכיבי ערכה (מערכת תמוגה / באר 24 באר) | DRT-01011-A1 | DRT-01011-A2 | |
100 T | 500 T | ||
חֵלֶקאני | Buffer CL | 20 מ"ל | 100 מ"ל |
Foregene Protease Plus II | 400 μl | 1 מ"ל × 2 | |
Buffer ST | 1 מ"ל × 2 | 10 מ"ל | |
חֵלֶקII | מחק DNA | 400 μl | 1 מ"ל × 2 |
RT Mix | |
רכיבי ערכה (מערכת תגובה של 20 μl) | DRT-01011-B1 |
200 T | |
5× Direct RT Mix | 800 μl |
ddH ללא RNase2O | 1.7 מ"ל × 2 |
מיקס qPCR | ||
רכיבי ערכה (מערכת תגובה של 20 μl) | DRT-01021-C1 | DRT-01021-C2 |
200 T | 1000 T | |
2× Direct qPCR Mix-Taqman | 1 מ"ל × 2 | 1.7 מ"ל × 6 |
20× ROX Reference Dye | 40 μl | 200 μl |
ddH ללא RNase2O | 1.7 מ"ל | 10 מ"ל |
מדריכי הוראות: