לקיים את החוזה", תואם את דרישת השוק, מצטרף מהתחרות בשוק על ידי איכותו הטובה כמו כן מספק תמיכה מקיפה ומעולה יותר ללקוחות כדי לאפשר להם להפוך למנצחים גדולים.הרדיפה של החברה, היא בהחלט ההנאה של הלקוחות עבור סין המוצר החדש הנמכר ביותר ערכת מיצוי DNA&Rna ויראלי, הרחבנו את העסק שלנו לגרמניה, טורקיה, קנדה, ארה"ב, אינדונזיה, הודו, ניגריה, ברזיל וכמה אזורים אחרים בעולם.אנו עובדים קשה כדי להיות אחד הספקים העולמיים הטובים ביותר.
לקיים את החוזה", תואם את דרישת השוק, מצטרף מהתחרות בשוק על ידי איכותו הטובה כמו כן מספק תמיכה מקיפה ומעולה יותר ללקוחות כדי לאפשר להם להפוך למנצחים גדולים.המרדף של החברה, הוא בהחלט הנאה של הלקוחות עבורערכת מיצוי Rna&DNA בסין וחילוץ חומצות גרעין, אנו מצפים ליצור איתך קשר מועיל הדדי על בסיס המוצרים והפתרונות האיכותיים שלנו, המחירים הגיוניים והשירות הטוב ביותר שלנו.אנו מקווים שהמוצרים שלנו יביאו לכם חוויה נעימה ויישאו תחושת יופי.
מדריכי הוראות:Kit Total RNA Isolation Plant Plus מדריך הוראות

לקיים את החוזה", תואם את דרישת השוק, מצטרף מהתחרות בשוק על ידי איכותו הטובה כמו כן מספק תמיכה מקיפה ומעולה יותר ללקוחות כדי לאפשר להם להפוך למנצחים גדולים.הרדיפה של החברה, היא בהחלט ההנאה של הלקוחות עבור סין המוצר החדש הנמכר ביותר ערכת מיצוי DNA&Rna ויראלי, הרחבנו את העסק שלנו לגרמניה, טורקיה, קנדה, ארה"ב, אינדונזיה, הודו, ניגריה, ברזיל וכמה אזורים אחרים בעולם.אנו עובדים קשה כדי להיות אחד הספקים העולמיים הטובים ביותר.
מוצר חדש בסין ערכת מיצוי Rna&DNA וחילוץ חומצות גרעין, אנו מצפים ליצור איתך קשר מועיל הדדי על בסיס המוצרים והפתרונות האיכותיים שלנו, המחירים הסבירים והשירות הטוב ביותר.אנו מקווים שהמוצרים שלנו יביאו לכם חוויה נעימה ויישאו תחושת יופי.

העמוד נסתם

לאחר סתום העמודה, תפוקת ה-RNA מופחתת או אפילו בלתי אפשרית כדי לטהר את ה-RNA, ומסת ה-RNA המתקבלת נמוכה.

ניתוח סיבות נפוצות:

1. הפסקות לדוגמא אינן יסודיות.

שבירת דגימה אינה גורמת לחלוטין לחסימת עמודת ניקוי ה-DNA, תוך שהיא משפיעה על תפוקת ה-RNA ועל איכותו.אנו ממליצים על פעולת טחינה מהירה בחנקן נוזלי מספיק כאשר שברת את הדגימות, נסה לרסק את דופן התא המדגם, קרום התא ורקמות אחרות.עבור דגימות צמחים של פוליסכרידים פוליאלים, אנו ממליצים להשתמש ב-Plant Total RNA ISOLATION KIT PLUS.

2. כאשר שואבים את העל הדגימה המופרדת עם עמודת ניקוי DNA, המשקע האפשרי של התא עשוי להישאף.

המשקעים המפוצלים של התא יגרמו לעמודת ה-RNA-ONLY אשר תיחסם בעת ביצוע פעולת ספיחת ה-RNA (ראה שלב 6).אנו ממליצים לך בזהירות כשאתה שואב את הסופרנטנט הזה כדי למנוע מציצת פסולת תאים.

3. הכמות הראשונית לדוגמא גדולה מדי.

שימוש מוגזם בדגימה יגרום לפיצול דגימה לא שלם או תמוגה לא מלאה של תאים על ידי Buffer PSL1, וכתוצאה מכך לחסימה של עמודת הטיהור במהלך הטיהור.ערכת בידוד כולל RNA של צמח כל דגימת הפעלה מטוהרת בודדת היא 50 מ"ג.עבור דגימות צמחים של פוליסכרידים פוליאלים, אנו ממליצים לנסות את Plant Total RNA ISOLATION KIT PLUS.

4. הטמפרטורה של הצנטריפוגה נמוכה מדי.

כל תהליך הבידוד והטיהור של ה-RNA מתבצע בטמפרטורת החדר (20-25°C), אלא שרקמת המדגם נשברת על ידי חנקן נוזלי. הטמפרטורה של כמה צנטריפוגות קריוגניות נמוכה מ-20℃, שעלול לגרום לחסימה של עמודת ניקוי DNA ו/או עמודת RNA בלבד.אם זה קורה, הגדר את טמפרטורת הצנטריפוגה ל-20-25℃, וודא שתערובת התמוגה ו/או הסופרנטנט בתוספת אתנול חוממו מראש ל-37°C.

לא מופק RNA או תפוקת RNA נמוכה

בדרך כלל ישנם גורמים רבים המשפיעים על יעילות ההחלמה, כגון: תכולת RNA מדגם, שיטת הפעולה, נפח הפליטה וכו'.

ניתוח של סיבות נפוצות להלן:

1. בוצעה אמבט קרח או צנטריפוגה בטמפרטורה נמוכה (4 מעלות צלזיוס) במהלך הפעולה.

הצעה: יש לפעול בטמפרטורת החדר (15-25°ג) בכל התהליך, אל תעשה אמבט קרח וצנטריפוגה בטמפרטורה נמוכה.

2. ה-RNA הושפל עקב שימור לא תקין של הדגימה או שימור לטווח ארוך של הדגימה.

המלצה: יש להקפיא במהירות דגימות שנאספו טרי בחנקן נוזלי, ולאחר מכן לאחסן ב-80 מעלות צלזיוס למשך זמן רב, להימנע מהקפאה והפשרה חוזרת של דגימות;או להשרות מיד את הדגימות בתמיסת RNAlater מייצב RNA (דגימות מהחי).

3. פיצול דגימה לא מספיק ותמוגה מובילים לחסימה של עמודת הטיהור.

הצעה: בעת טחינת הרקמה, אנא ודא שהרקמה טחונה מספיק, והעבר אותה במהירות למאגר PSL1 שהוכן מראש (וודא שהפרופורציה הנכונה של β-ME נוספה, ראה שלב 1 של ההליך).

4.הפלט נוסף בצורה שגויה.

הצעה: ודא ש-RNase-Free ddH2O מטפטף לאמצע קרום עמודת הטיהור.

5. הנפח הנכון של אתנול מוחלט לא התווסף למאגר PSL2 או למאגר PRW2.

הצעה: אנא עקוב אחר ההוראות, הוסף את הנפח הנכון של אתנול מוחלט למאגר PSL2 ול-Buffer PRW2 וערבב היטב לפני השימוש בערכה.

6. כמות דגימת הרקמה אינה הולמת.

הצעה: השתמש ב-50 מ"ג של רקמה לכל 500 μl של Buffer PSL1.שימוש בכמות גדולה מדי של רקמה יקטין את כמות ה-RNA המופק וטוהר ה-RNA המתקבל יקטן אף הוא.אנו ממליצים בחום שהמינון הראשוני של הדגימה לא יעלה על 50 מ"ג לכל פעולת מיצוי RNA.

7. נפח חלוקה לא מתאים או שחרור לא שלם.

הצעה: נפח eluent של עמודת הטיהור הוא 50-200 μl;אם אפקט האלוציה אינו משביע רצון, מומלץ להאריך את הזמן בטמפרטורת החדר לאחר הוספת RNase-Free ddH2O מחומם מראש, כגון 5-10 דקות.

8. בעמודת הטיהור יש שאריות אתנול לאחר כביסה עם BufferPRW2.

הצעה: אם הצינור הריק עובר צנטריפוגה למשך דקה ועדיין נותר אתנול לאחר הכביסה במאגר PRW2, אתה יכול להגדיל את זמן הצנטריפוגה של הצינור הריק ל-2 דקות, או למקם את עמודת הטיהור בטמפרטורת החדר למשך 5 דקות כדי להסיר לחלוטין את שאריות האתנול.

9. נעשה שימוש לא נכון בערכה.

הצעה: עבור דגימות צמחים של פוליסכרידים פוליפנוליים, ייתכן ששימוש בערכות נפוצות כגון Plant Total RNA Isolation Kit לא יוכל להשיג דגימות RNA אידיאליות.אנו ממליצים לך להשתמש ב-Plant Total RNA IsolationKit Plus, אשר תוכנן במיוחד עבור דגימות צמחים פוליסכרידים פוליפנוליים.ערכה שפותחה במיוחד להפקת RNA מדגימות צמחי פוליפנול ופוליסכריד.

ערך OD260/OD280 נמוך

פליטת RNA עם ddH2O ומשמשת לקריאות ספקטרופוטומטר גורמת לערכי OD260/OD280 נמוכים.אנו ממליצים להשתמש ב-10 mM Tris-HCl, pH 7.5 (ולא ב-RNase-Free ddH2O להוצאת RNA) כדי להשיג ערכי OD260/OD280 נכונים יחסית, ראה "מבחני ריכוז וטיהור RNA" בעמוד 19.

ה-RNA המטוהר מתכלה

איכות ה-RNA המטוהרת קשורה לגורמים כמו שימור דגימות, זיהום RNase ומניפולציה.

ניתוח של סיבות נפוצות:

1. דגימות רקמות לא אוחסנו בזמן לאחר האיסוף.

המלצה: אם לא נעשה שימוש בדגימות הרקמה בזמן לאחר האיסוף, נא לאחסן אותן בחנקן נוזלי בטמפרטורה נמוכה באופן מיידי או להעביר אותן ל-80 מעלות צלזיוס לאחסון לטווח ארוך לאחר הקפאה מהירה בחנקן נוזלי, או לטבול מיד את הדגימות בתמיסת RNAlater מייצב RNA (דגימות מהחי).עבור מיצוי RNA, נסה להשתמש בדגימות רקמה טריות שנאספו.

2. הקפאה והפשרה חוזרת של דגימות רקמה.

הצעה: כשמאחסנים דגימות רקמה, עדיף לחתוך אותן לחתיכות קטנות לשימור, ולהוציא חלק מהן בעת ​​השימוש בהן כדי למנוע פירוק ה-RNA הנגרמת מהקפאה והפשרה חוזרת של הדגימות.

3. RNase מוכנס לחדר הניתוח או לא לובשים כפפות חד פעמיות, מסכות וכו'.

הצעה: ניסויי מיצוי RNA מבוצעים בצורה הטובה ביותר בפעולות RNA נפרדות, ויש לנקות את טבלת המעבדה לפני הניסוי, וללבוש כפפות ומסכות חד פעמיות במהלך הניסוי כדי למנוע פירוק RNA שנגרם מהחדרת RNase במידה רבה ביותר.

4. המגיב מזוהם על ידי RNase במהלך השימוש.

הצעה: החלף בסדרה חדשה של ערכות מיצוי RNA כולל של צמחים לניסויים קשורים.

5. צינורות הצנטריפוגה וקצות הפיפטה המשמשים למניפולציה של RNA מזוהמים עם RNase.

הצעה: ודא שצינורות הצנטריפוגה, קצות הפיפטה, הפיפטות וכו' המשמשים בחילוץ RNA הם כולם ללא RNase.

מדריכי הוראות:

Kit Total RNA Isolation Plant Plus מדריך הוראות