הארגון שומר על תפיסת הפרוצדורה "ניהול מדעי, ראשוניות באיכות גבוהה ויעילות, רוכש עליון עבור יצרן סין עבור 2× Premix מרוכז לדגימה לא מטוהרת בזמן אמת כמותי PCR Direct Multiplex Probe Qpcr Mix Plus U, העסק שלנו מוקדש לספק ללקוחות מוצרים באיכות מעולה ובמחיר אגרסיבי, מה שהופך כל לקוח ולקוח מרוצה.
הארגון שומר על תפיסת ההליך "ניהול מדעי, קדימות גבוהה ואיכותית, רוכש עליון עבורChina Taq DNA Polymerase ו-Qpcr, לחברה שלנו יש כוח רב ובעלת מערכת רשת מכירות יציבה ומושלמת.אנו מאחלים שנוכל ליצור קשרים עסקיים תקינים עם כל הלקוחות מבית ומחוץ על בסיס יתרונות הדדיים.
עקרונות עיצוב פריימר בזמן אמת PCR

פריימר קדימה ופרימר לאחור

עבור PCR בזמן אמת, עיצוב פריימר חשוב מאוד.פריימרים קשורים לספציפיות וליעילות של הגברה של PCR, וניתן לעצב אותם תוך התייחסות לעקרונות הבאים:

• אורך פריימר: 18-30bp.
• תכולת GC: 40-60%.
• ערך Tm: תוכנת עיצוב פריימר, כמו Primer 5, יכולה לתת את ערך ה-Tm של הפריימר.ערכי ה-Tm של הפריימרים במעלה הזרם והמורד הזרם צריכים להיות קרובים ככל האפשר.ניתן להשתמש גם בנוסחת חישוב Tm: Tm = 4°C (G + C) + 2°C (A + T).בעת ביצוע PCR, טמפרטורה מתחת לערך ה-primer Tm של 5 מעלות צלזיוס נבחרת בדרך כלל כטמפרטורת החישול (העלייה המקבילה בטמפרטורת החישול יכולה להגביר את הספציפיות של תגובת ה-PCR).
• פריימרים ומוצרי PCR:

1. אורך המוצר להגברת PCR של פריימר עיצוב הוא רצוי 100-150bp.
2. יש להימנע ככל האפשר מפריי תכנון באזור המבני המשני של התבנית.
3. הימנע מהיווצרות של 2 או יותר בסיסים משלימים בין קצוות 3′ של פריימרים במעלה הזרם ומורד הזרם.
4. בסיס מסוף פריימר 3′ לא יכול להיות קיים עם 3 נוספים G או C רצופים.
5. לפריימרים עצמם לא יכולים להיות מבנים משלימים, אחרת יווצר מבנה סיכת ראש, המשפיע על הגברה של PCR.
6. יש לפזר את ATCG בצורה שווה ככל האפשר ברצף ה-primer, ויש להימנע מהבסיס המסוף של 3′ כ-T.

נִספָּח1: גell ישירRT-qPCR רכיב ערכהחבילת תוספת לא

1. פתרון תמיסת תאים

 הארגון שומר על תפיסת הפרוצדורה "ניהול מדעי, ראשוניות באיכות גבוהה ויעילות, רוכש עליון עבור יצרן סין עבור 2× Premix מרוכז לדגימה לא מטוהרת בזמן אמת כמותי PCR Direct Multiplex Probe Qpcr Mix Plus U, העסק שלנו מוקדש לספק ללקוחות מוצרים באיכות מעולה ובמחיר אגרסיבי, מה שהופך כל לקוח ולקוח מרוצה.
יצרן סין עבורChina Taq DNA Polymerase ו-Qpcr, לחברה שלנו יש כוח רב ובעלת מערכת רשת מכירות יציבה ומושלמת.אנו מאחלים שנוכל ליצור קשרים עסקיים תקינים עם כל הלקוחות מבית ומחוץ על בסיס יתרונות הדדיים.

עקרונות עיצוב פריימר בזמן אמת PCR

פריימר קדימה ופרימר לאחור

עבור PCR בזמן אמת, עיצוב פריימר חשוב מאוד.פריימרים קשורים לספציפיות וליעילות של הגברה של PCR, וניתן לעצב אותם תוך התייחסות לעקרונות הבאים:

• אורך פריימר: 18-30bp.
• תכולת GC: 40-60%.
• ערך Tm: תוכנת עיצוב פריימר, כמו Primer 5, יכולה לתת את ערך ה-Tm של הפריימר.ערכי ה-Tm של הפריימרים במעלה הזרם והמורד הזרם צריכים להיות קרובים ככל האפשר.ניתן להשתמש גם בנוסחת חישוב Tm: Tm = 4°C (G + C) + 2°C (A + T).בעת ביצוע PCR, טמפרטורה מתחת לערך ה-primer Tm של 5 מעלות צלזיוס נבחרת בדרך כלל כטמפרטורת החישול (העלייה המקבילה בטמפרטורת החישול יכולה להגביר את הספציפיות של תגובת ה-PCR).
• פריימרים ומוצרי PCR:

1. אורך המוצר להגברת PCR של פריימר עיצוב הוא רצוי 100-150bp.
2. יש להימנע ככל האפשר מפריי תכנון באזור המבני המשני של התבנית.
3. הימנע מהיווצרות של 2 או יותר בסיסים משלימים בין קצוות 3′ של פריימרים במעלה הזרם ומורד הזרם.
4. בסיס מסוף פריימר 3′ לא יכול להיות קיים עם 3 נוספים G או C רצופים.
5. לפריימרים עצמם לא יכולים להיות מבנים משלימים, אחרת יווצר מבנה סיכת ראש, המשפיע על הגברה של PCR.
6. יש לפזר את ATCG בצורה שווה ככל האפשר ברצף ה-primer, ויש להימנע מהבסיס המסוף של 3′ כ-T.

נִספָּח1: גell ישירRT-qPCR רכיב ערכהחבילת תוספת לא

1. פתרון תמיסת תאים

מדריכי הוראות:

 Quick Easy Cell Direct RT-qPCR Kit-Taqman