מבוא:

מולקולות RNA יכולות לקיים אינטראקציה נרחבת עם מולקולות ביולוגיות אחרות, כגון חלבון, DNA ו-RNA, ולכן קיימות בתאים ובאורגניזמים בצורה של קומפלקסים מקרו-מולקולריים.ביניהם, מתחמי RNA-חלבון הם קיומו ותפקודו של RNA אחת הצורות החשובות של.RNA pull-down היא שיטה קלאסית לסינון וזיהוי מולקולות RNA, במיוחד החלבונים המקיימים אינטראקציה של מולקולות lncRNA, והיא מוכרת על ידי רוב החוקרים וכתבי עת אקדמיים סמכותיים בינלאומיים.היום FORREGENE ישתף אתכם בעקרון הניסוי ובתהליך הטכני של הורדת RNA, אולי תוכלו להשתמש בו

1. העיקרון הניסיוני של טכנולוגיית RNA pull down:

שעתוק וסינתזה במבחנה של שברי LncRNA או lncRNA מטרה המסומנים ביוטין (כולל שברי RNA המשמשים כבקרות חיוביות ושליליות), ודגירה עם תמציות תאים;השתמש בחרוזים מגנטיים המעוגנים באווידין כדי לאסוף קומפלקסים של חלבון RNA או RNA-RNA, לאחר כביסה יסודית, הקומפלקס נפלט.אם מזהים את מולקולת היעד של החלבון שמקיימת אינטראקציה עם lncRNA, בצע אלקטרופורזה של חלבון על מוצר ה-RNA-pull down, זיהוי חלבון היעד על ידי צביעת כסף וחתוך את הג'ל עבור ספקטרומטריית מסה;גם לבצע ישירות אימות Western blot על המוצר הנפתח;אם זוהה עבור מולקולות יעד של RNA המקיימות אינטראקציה עם lncRNA, תוצרי RNA-pull down נתונים למיצוי RNA וזיהוי qRT-PCR ספציפי מבוצע.

2. תהליך ניסוי טכנולוגי של RNA למשוך למטה:

3. שירות טכני להורדת RNA של FOREGENE:

תרבית תאים

הכנת תמצית חלבון כולל/גרעיני/פלזמה

ניסוי RNA pull down

אלקטרופורזה SDS-PAGE, כתם כסף

ניסויי ספקטרומטריית מסה ו-WB

דוח ניסוי

4. מקרה ניסיוני

האיור הבא מציג את תוצאות ה-RNA pull down של FJ Bio-Bio וזיהוי אלקטרופורזה של SDS-PAGE, שבו החץ האדום מסמן את רצועת ההבדל:

קבוצת המחקר של פרופסור סונג שו מאוניברסיטת סצ'ואן צברה 15 שנים של הצטברות ארוכת טווח בתחום חקר lncRNA.Foregene Bio וקבוצת המחקר של פרופסור Song Xu שיתפו פעולה כדי להשיק את טכנולוגיית RNA pull down של lncRNA, שתיתן לך תוצאה משביעת רצון עבור הניסוי שלך.