מיצוי חומצת גרעין היא מיומנות מבוא לניסויים בביולוגיה מולקולרית.אם הוא יכול לשלוט במיומנות הזו ולהשתמש במיומנות זו הפך גם לתנאי מוקדם עבור נסיינים מאוחרים יותר לשדרג למאסטרים ניסיוניים.
על פי חומרי מחקר שונים, הנסיינים מחולקים בעיקר לשלושת הסוגים הבאים:
מגמת בעלי חיים, מגמת צמחים, מגמת מיקרוביולוגיה
כל סוג של נסיין ימשיך להעתיק עותקים כדי לטפח סט של מיומנויות בלעדיות עבור דוגמאות ספציפיות.
כיום, העורך רוצה להביא לנסיינים ציוד ואביזרים שאינם זמינים דרך הצינוק.בעזרתם תוכלו לשדרג במהירות לכל הכיוונים.זה לא חלום להפוך לאל ניסיוני.
נושא זה מיועד לנסיינים מקצועיים בצמחים (גם נסיינים של מקצועות אחרים יכולים ללמוד ממנו~).
אני מאמין שכל דור של נסיינים ישמע על שיטות המיצוי הקלאסיות של חומצות גרעין צמחיות שעברו מדור לדור מקודמיהם.שלושת השמות הגדולים בתעשיית מיצוי הצמחים.
למרות שהחבר'ה הגדולים מצוינים, עדיין יש להם כמה חסרונות בלתי נמנעים.
שיטת TRIzol
משמש לעתים קרובות לחילוץ
RNA
●רעיל ומסורבל
●מכיל זיהום גנום
שיטת CTAB
משמש לעתים קרובות לחילוץ
גנוםDNA
● גוזל זמן
●קשה יותר להסיר CTAB בכביסה מאשר מלח, לכמות קטנה של שאריות תהיה השפעה עצומה על פעילות האנזים
שיטת SDS
משמש לעתים קרובות לחילוץ
פלסמיד
●לא מתאים לצמחים בעלי תכולת פוליסכרידים גבוהה
●זיהום בחלבונים
בחברה מודרנית זו עם איטרציות עדכונים במהירות כפולה, שיטות הפעולה המסורתיות אינן מסוגלות עוד לענות על צורכי הנסיינים, ושדרוגי ציוד קרובים.
ערכת מיצוי חומצת גרעין של Foregene נבדקה N פעמים על ידי עשרות נסיינים.הוא פשוט לתפעול, אינו משתמש בשום ריאגנטים רעילים ואינו מוסיף אנזימים.חומצת הגרעין המתקבלת היא בטוהר גבוה, החיוני לפעולת המיצוי היומית של נסיינים מצוינים.
ערכת בידוד RNA של Foregene
כאן אחשוף בפני הנסיינים גם טכניקת פעולה נסתרת, שהיא בחירת שיטת המיצוי המתאימה לפי סוג הצמח (השיטה לקביעת סוג הצמח נמצאת בסוף המאמר!), מכיוון שחלק מהפוליסכרידים והפוליפנולים מהצמחים הם בעלי תכולה גבוהה, ושיטות מסורתיות קטלניות.לא מספיק לשלוט.
ובכן, זה ככה...
שיטת TRIzol כרעה ישירות מתחת לדגימות עם רמות גבוהות של פוליסכרידים ופוליפנולים כמו עלי בננה, עלי גינקו ועלי כותנה.
לצורך כך פיתחה Foregene שני כלים יעילים עבור נסיינים.ערכת מיצוי ה-RNA הצמחית בעלת תכולת פוליסכרידים ופוליפנולים נמוכה ותכולת פוליסכרידים ופוליפנולים גבוהה יכולה להרוג את האויבים בצורה ממוקדת, כך שהנסיינים לא יפחדו יותר מצמחים שונים.פשוט החליפו את הציוד ישירות!
בנוסף לצורך בשדרוג שיטת החילוץ, יש לשדרג גם את פעולות העיבוד המקדים לדוגמא.
בגלל המבנה המיוחד של דגימות צמחים, קשה יותר לטחון ולרסק את השורשים והגבעולים הקשים יותר של חלק מהצמחים.
בתעשיית הטחינה, כ-80% מהאנשים משתמשים בחנקן נוזלי לטחינה, בעוד שפחות מ-20% משתמשים בשחיקה חשמלית ובתנודת חרוזי גריסה.
למרות שטחינת חנקן נוזלי היא זולה וקלה לשימוש, זה סיוט עבור נסיינים עם דרישה גדולה לדגימה לטחון בכל פעם ומאמץ!אם המרגמה לא מנוקה, זה יגרום לזיהום צולב בין דגימות.
השפעת השחזה החשמלית משתנה מאדם לאדם, ולהרגלי הפעולה של הנסיינים תהיה השפעה רבה יותר על שלמות חומצת הגרעין, ונדרשת פעולה בטמפרטורה נמוכה במידת הצורך.
לכן, ניתן להתייחס לתנודת חרוז השחזה כציוד השחזה הפשוט והיעיל הנוכחי.
מצבי התנודה הנפוצים כוללים תנודה אנכית, תנודה הדדית אופקית ותלת מימד (תנודה אופקית).עם זאת, מגרסה הרקמות של Foregene פורצת דרך הדגם הקיים ומאמץ שיטת תנודה 4D חדשה כדי להפוך את השחזה לאחידה יותר.
עמוד בדרישות מדגם שונות, קל לתפעול
טכנולוגיית ריסוק 4D ייחודית, יעילות הריסוק מוגברת ב-20%
המדגם סגור לחלוטין, ללא זיהום צולב
שקט, ≤56 דציבלים
השווה את תוצאות הניסוי לגל~
דגימת בדיקה: 50 מ"ג עלי חיטה (תכולה נמוכה של פוליסכרידים ופוליפנולים)
מיצוי סוג חומצת גרעין: RNA
כמות נקודתית: 5μl
ערכת המיצוי המשמשת היא ערכת המיצוי של Foregene Plant Total RNA (RE-05011)
בהשוואת הנתונים וגרף האלקטרופורזה, ניתן לראות שריכוז וטוהר ה-RNA המופק לאחר הטחינה במכונה גבוהים מזה של טחינת החנקן הנוזלי.יחד עם זאת, מכיוון שהטחינת המכונה יכולה לשבור את הדגימה בצורה מלאה יותר, ניתן לחלץ טוב יותר את ה-RNA הקטן ולשמור על שלמות ה-RNA.
דגימת בדיקה: 50 מ"ג עלי גינקו (תכולת פוליסכרידים ופוליפנולים גבוהה)
מיצוי סוג חומצת גרעין: RNA
כמות נקודתית: 5μl
שימוש בערכת מיצוי רנ"א כוללת של צמח Polysaccharide Polyphenol (RE-05021)
תסתכל על קבוצת דגימות זו עם תכולה גבוהה של פוליסכרידים ופוליפנולים.ההשפעה ברורה עוד יותר.באותו טוהר, ריכוז ה-RNA הטחינה במכונה הוא כמעט פי 5 מזה של טחינת חנקן נוזלי, ורנ"א קטן עדיין נראה קלוש ~
אם אתה מרגיש שאף אחד מהציוד הנ"ל אינו מהיר מספיק, אז העורך צריך להמציא את הציוד האולטימטיבי!
סדרת צמח ישיר PCR
התכונה הייחודית של ציוד זה היא שאין צורך לטחון ולשבור את עלי הצמח או הזרעים, והם נזרקים ישירות לתוך צינור ה-EP לצורך תמוגה, ותערובת התמוגה המתקבלת יכולה לשמש כתבנית לתגובת PCR.זה פשוט כמו צעד אחד מהר יותר!יחד עם זאת, סדרת ה-PCR הישירה של Foregene Plants מצוידת במערכת UNG נגד זיהום, כך שהנסיינים כבר לא דואגים לזיהום אירוסול במעבדה ויכולים לבצע את הניסוי בקלות.
עצות שיפוט:
כיצד לשפוט האם מדובר בצמח פוליפנול פוליסכריד
קח כ-20 מ"ג גוש רקמה והכנס אותו לשפופרת צנטריפוגה נקייה של 1.5 מ"ל, הוסף 200 ul 200mM תמיסת NaOH, הנח אותו ב-95 ℃ למשך 10 דקות, צפה בשינוי הצבע לאחר תמוגה
1. אם צבע הליזאט ירוק או צהוב בהיר זה אומר שתכולת פוליפנולים רקמות נמוכה ומומלץ להשתמש בסדרת Foregene Plant
2. אם הליזאט הוא חום-צהוב או חום-אדום, זה אומר שתכולת הפוליפנולים ברקמות גבוהה, ומומלץ להשתמש ב-Foregene Polysaccharide Polyphenol Plant Plus Series
זמן פרסום: 20 באוגוסט 2021
