האם אתה עדיין משתמש בטריזול כדי לחלץ RNA?
אלוהים, אל תיתן לי לדאוג לבריאות שלך!
טריזול עומד להידחק לשוליים, אל תגיד לי שאתה עדיין בחושך?

המרכיב העיקרי של ריאגנט טריזול הוא פנול, וגם ריאגנטים אורגניים כגון כלורופורם מתווספים בפעולת הניסוי.חשיפה ארוכת טווח תגרום נזק לבריאות שלך, במיוחד מגע ישיר עם העור עלול לגרום לכוויות כימיות קשות וצלקות קבועות.

בנסיבות רגילות, שותפי המעבדה יכולים להפחית את הסכנות רק על ידי התחמשות מלאה (לבישת מעילי מעבדה, כפפות ומסכות).

והעצה שלי אליך היא: נא להחליף את טריזול ישירות כדי למנוע נזק מהמקור.

1. תוצר הדור הראשון של מיצוי RNA
יצא ב-1987 (ריאגנטים של טריזול)

יתרון:
מיצוי מלא יותר

חסרונות:
נדרשים ריאגנטים רעילים כגון גואנידין איזותיוציאנט-פנול-כלורופורם;
פעולה מסורבלת;
צריך להשתמש ב-DNase כדי להסיר זיהום DNA

2. תוצר הדור השני של מיצוי RNA
יצא בשנת 1994 (QIAGEN RNeasy ומוצרים מקומיים ביותר)

יתרון:
שיטה צנטריפוגלית עמודה מאומצת, אשר קלה לתפעול;

חִסָרוֹן:
צריך לעשות צנטריפוגה כדי להסיר פסולת רקמה
צריך להשתמש ב-DNase כדי להסיר זיהום DNA

3.תוצר הדור השלישי של מיצוי RNA
יוצא בשנת 2005 (QIAGEN RNeasy Plus ו-Fאורג'יןמוצרי סדרת טיהור RNA)

יתרון:
השתמש ישירות בעמודה להסרת DNA כדי להסיר דנ"א ופסולת רקמות בו זמנית, חוסך זמן ומאמץ;
בטוח ונוח, אין צורך להוסיף עמודת סינון ו-DNase כדי להסיר בקלות זיהומים ולהימנע מזיהום DNA

בואו נסתכל על ההבדלים התפעוליים בין מוצר הדור הראשון (Trizol), מוצר הדור השני (RNeasy) ומוצר הדור השלישי (Foregene) של מיצוי RNA:

הפעולה באיור ברורה: למוצר הדור השלישי יש יתרונות ברורים

רק שלוש מילים לתאר: קל!מָהִיר!בְּטִיחוּת

תרשים ה-PK של תוצאות הניסוילתוצרי הדור הראשון, הדור השני והדור השלישי של מיצוי RNA:

1. Eלקטרופורטוגרם

הדור הראשון (1: Trizol)
הדור השני (2:QIAGEN RNeasy)
הדור השלישי (3: QIAGEN RNeasy plus, 4: Foregene)

איזה סוג של מוצר הוא טוב, אתה תדע בהשוואה
RNA מופק באמצעות ערכת Foregene
לא רק ריכוז גבוה אלא גם שלמות טובה

גרף 2.qPCR (גרף עקומת הגברה)

הדור הראשון (Trizol)

הדור השני (כחול שמייםאומרQIAGEN RNeasy-, אדוםאומרQIAGEN RNeasy +)

הדור השלישי (כחול פירושו Foregene, ירוק פירושו QIAGEN RNeasy plus)

(הערה: גרף QIAGEN RNeasy מהדור השני של qPCR פירושו שהערכה לא מוסיפה DNase ולא מסירה זיהום DNA. לכן ה-CT גבוה יותר והתוצאה לא מדויקת; QIAGEN RNeasy + פירושו שנוספו DNase וזיהום ה-DNA הוסר, והתוצאה מדויקת)

בין אם מדובר באלקטרופורטוגרם או גרף עקומת הגברה כמותית של PCR, האיכות של מוצרי Foregene אינה נחותה ממוצרים מיובאים זרים.