מבוא:

RNA, שם מדעי ribonucleic acid, הקיצור שלו מגיע מ-RiboNucleic Acid, היא סוג של חומצת גרעין שנוצרת על ידי חיבור של לפחות עשרות ריבונוקלאוטידים באמצעות קשרי פוספודיסטר.

הנחת היסוד של חקר ה-RNA היא לחלץ רנ"א נטול זיהום, וניתן לסכם את העיקרון הבסיסי של מיצוי RNA באופן גס כדלקמן:

1. תחילה ישבשו את התאים

2. לאחר מכן הסר זיהומים מקרומולקולריים (חלבונים, שומנים, DNA וכו')

3. לבסוף, ה-RNA מושקע תוך הסרת מלחים וממיסים אורגניים, וטיהור נוסף של ה-RNA

שיטת החילוץ בעבר ובהווה

הדור הראשון של שיטת מיצוי RNA היא שיטת המשקעים TRIzol (הריאגנטים המשמשים כוללים גואנידין איזותיוציאנט, פנול, כלורופורם וכו') שהומצאה על ידי סבא בשם פיוטר חומצ'ינסקי וסבתא ניקולטה סאצ'י, מכיוון שההמצאה הזו מאפשרת מיצוי RNA מהיר וקל, מאז החלו את מחקר ה-RNA.

מאוחר יותר, סבא מכר את הפטנט הזה לאינוטרוגן, ואינוטרוגן קידמה את השיטה הזו בעולם והפכה לשיטה בשימוש נרחב.

מאוחר יותר, Invitrogen נרכשה על ידי Thermo!

מוצר מייצג: ריאגנט TRIzol של Invitrogen

עם זאת, שיטת המשקעים של TRIzol דורשת משקעים ומיצוי מרובים של RNA, והריאגנטים המשמשים הם רעילים ולוקח זמן רב לפעול.

לכן, נוצרה שיטת טיהור עמוד-אנזים מהדור השני, תוך שימוש בממברנת סיליקה ג'ל כחומר ספיחה ספציפי של חומצת גרעין כדי למקסם את שחזור ה-RNA בדגימה תוך הסרת זיהומים אחרים.

שיטת הדור השני מפשטת את הפעולה על בסיס ביצועים יציבים, מפחיתה את גורם הסיכון ומשפרת את יעילות מיצוי ה-RNA.

מוצרים מייצגים: QIAGEN RNeasy ומוצרים מקומיים

עם זאת, שיטות הדור הראשון והשני דורשות שימוש ב-DNase כדי להסיר זיהום DNA, מה שמביא אי נוחות מסוימת לניסויים הבאים במורד הזרם.שיורי DNase יפחית את היעילות של שעתוק הפוך ויפחית את סינתזת ה-cDNA של הגדיל הראשון, ובכך ישפיע על דיוק התוצאות.

לכן, שיטת המיצוי של הדור השלישי מותאמת על בסיס הדור השני.הניסוי אינו מצריך הוספת אנזימים, וניתן להשיג RNA בקלות עם שתי עמודות בלבד.

עמודה 1: עמודת ניקוי DNA לניקוי DNA

עמודה 2: עמודה RNA בלבד סופחת ומשחזרת RNA באופן ספציפי

פעולה פשוטה כזו לא רק חוסכת זמן, אלא גם מקלה על פעולתם של ניסויים במורד הזרם!

מוצרים מייצגים: QIAGEN RNeasy Plus ופורג'יןמוצרי סדרת טיהור RNA

（RNeasy Plus）

（של פורג'יןערכת בידוד כולל RNA של צמח）

אומר לך בשקט!ערכת ה-RNA של Foregene מציגה גם מחק RNase סופר קל לשימוש, שיכול להסיר לחלוטין 400 מיקרוגרם של RNase על פני השטח המוצקים תוך דקה, מבלי להוסיף חומרים רעילים לגוף האדם!

תמונה1: טבלת השוואת תהליכים תפעוליים

המוצרים של Foregene יכולים להשלים מיצוי RNA בשני שירים בלבד, אל תגרום לאחרים לקנא בהתקדמות הניסוי שלך!

תמונה2:Eתוצאות ניסוי טבלת השוואה

הדור הראשון (1: TRIzol)

הדור השני (2: RNeasy של QIAGEN)

הדור השלישי (3: RNeasy plus של QIAGEN, 4: Foregene)

תמונה3: גרף qPCR (גרף עקומת הגברה)

הדור הראשון (ירוק פירושו TRIzol -, אדום פירושו TRIzol +)

הדור השני (כחול שמיים פירושו QIAGEN RNeasy-, אדום פירושו QIAGEN RNeasy +)

הדור השלישי (כחול פירושו QIAGEN RNeasy plus, ירוק פירושו Foregene)

(הערה: גרף qPCR "-" מציין שלא התווסף DNase ולא הוסר זיהום DNA. לכן ה-CT גבוה יותר והתוצאה לא מדויקת; "+" מציין שנוספו DNase וזיהום ה-DNA הוסר, התוצאה מדויקת)

כל שדרוג טכני אומר שתפעול הניסוי מתפתח לכיוון פשוט וידידותי יותר למשתמש.

Foregene שואפת לעזור לחוקרים מדעיים נוספים לחסוך זמן ועלות ניסויים, להשיג תוצאות ניסויים באיכות גבוהה וליצור במשותף הישגי מחקר מדעיים בעלי ערך רב יותר.