Mouse Tail Direct PCR Kit-UNG Direct PCR Lysis Reagent (זנב עכבר) (עבור גנוטייפ)
תיאור ערכה:
הליסט של זנב העכבר משמש ישירות כתבנית להגברת PCR ללא מיצוי נפרד של DNA, שהוא מהיר ורגיש מאוד.נוספה מערכת נגד זיהום UNG כדי לחסל תוצאות חיוביות כוזבות.
◮לא נדרש טיהור DNA שגוזל זמן ויקר.
◮הביקוש לדוגמא קטן, פשוט קח זרע בודד.
◮אין צורך בטיפולים מיוחדים כמו גריסה וריסוק והתפעול פשוט.
◮מערכת ה-PCR האופטימלית מאפשרת ל-PCR סגוליות גבוהה יותר וסבילות חזקה יותר למעכבי תגובת PCR.
תיאורים
ערכה זו משתמשת במערכת חיץ תמוגה ייחודית כדי לשחרר במהירות DNA גנומי מזנבות עכברים, אוזניים, שרירים ודגימות רקמה אחרות לתגובות PCR, כך שהיא מתאימה במיוחד לבדיקות גנטיות בקנה מידה גדול.
תהליך שחרור ה-DNA הגנומי ממאגר התמוגה מסתיים תוך 10-30 דקות ב-65 מעלות צלזיוס.אין צורך בתהליכים אחרים כגון הסרת חלבון ו-RNA, וניתן להשתמש ב-DNA העקבות המשוחרר כתבנית לתגובת PCR.
2× M1-PCR קלTMמיקס (UNG) משתמש ב-dUTP במקום dTTP על בסיס 2× M1-PCR EasyTM מערבבים (UNG), ומוסיפים אנזים UNG (Uracil-N-glycosylase) שיכול לפרק את התבנית המכילה dUTP בו-זמנית.לפני תגובת ה-PCR, נעשה שימוש באנזים UNG לפירוק תוצר ה-PCR המכיל אורציל.לאנזים UNG לא תהיה כל השפעה על התבנית שאינה מכילה אורציל, ובכך יבטיח את הספציפיות והדיוק של ההגברה וימנע את האפשרות של בדיקות גנטיות בקנה מידה גדול.התרחש זיהום של מוצרי PCR.
D-Taq DNA פולימראז הוא פולימראז DNA שפותח במיוחד על ידי Foregene לתגובות PCR ישירות.ל-D-Taq DNA פולימראז יש סבילות חזקה למגוון מעכבי תגובת PCR, והוא יכול להגביר ביעילות כמויות עקבות של DNA במערכות תגובה מורכבות שונות, ומהירות ההגברה יכולה להגיע ל-2Kb/min, מה שמתאים במיוחד לתגובת PCR ישירה.
מפרטים
50×20µl rxns, 200×20µl rxns, 500×20µl rxns, 2000×20µl rxns
רכיבי ערכה
| חלק א' | מאגר MP |
| Foregene Protease Plus | |
| 6× מאגר טעינת DNA | |
| חלק שני | 2× M1 PCR קלTMמיקס (UNG) |
| הוראות | |
תכונות ויתרונות
■לא נדרש טיהור DNA שגוזל זמן ויקר.
■ הדרישה לדגימה קטנה, ניתן לבדוק רק רקמת עכבר של 5 מ"ג או זנב עכבר של 2-5 מ"מ.
■ אין צורך בטיפולים מיוחדים כמו טחינה וריסוק והתפעול פשוט.
■ מערכת ה-PCR האופטימלית גורמת ל-PCR סגוליות גבוהה יותר וסובלנות חזקה יותר למעכבי תגובה של PCR.
■ מערכת PCR נגד זיהום 2×M1-PCR קלTMמיקס (UNG), המבטל למעשה את הזיהום הנגרם על ידי מוצרי PCR ומבטיח את הספציפיות והדיוק של ההגברה.
פרמטרים של ערכה
היקף היישום: זנב עכבר, אוזן עכבר, שריר ורקמות אחרות.
DNA ששוחרר מתמוגגת דגימה: משמש רק כתבנית PCR.
ניתן להשתמש בערכה למטרות הבאות: זיהוי טרנסגנוזיס, גנוטיפ של בעלי חיים וכו'.
זרימת עבודה
אחסון וחיי מדף
יש לאחסן את חלק I של ערכה זו בטמפרטורה של 2-8℃.
ניתן לאחסן את המגיב Buffer AL במשך 12 חודשים בתנאים יבשים;ניתן לאחסן אותו ב-2-8℃ לאחסון ארוך יותר.
לריאגנט Foregene Protease יש נוסחה ייחודית.כדי להבטיח את פעילותו ויציבותו, נא לאחסן אותו בטמפרטורה של 4℃ למשך 12 חודשים.
ניתן לאחסן מאגר טעינת ריאגנט 6×DNA בטמפרטורה של 4℃ או -20℃ למשך זמן רב.
יש לאחסן את חלק II של ערכה זו ב-20℃.
ריאגנט 2×M1 PCR EasyTM Mix(UNG), אם נעשה בו שימוש תכוף, ניתן לאחסן אותו גם בטמפרטורה של 4℃ לאחסון לטווח קצר (השתמשו בו תוך 10 ימים).
