ערכת PCR ישיר של רקמות חיות (ללא כלי דגימה) פרוטוקול
תיאורים
ערכה זו משתמשת במערכת חיץ תמוגה ייחודית כדי לשחרר במהירות DNA גנומי מדגימות רקמה של בעלי חיים לתגובות PCR, כך שהיא מתאימה במיוחד לבדיקות גנטיות בקנה מידה גדול.
תהליך שחרור ה-DNA הגנומי ממאגר התמוגה מסתיים תוך 10-30 דקות ב-65 מעלות צלזיוס.אין צורך בתהליכים אחרים כגון הסרת חלבון ו-RNA, וניתן להשתמש ב-DNA העקבות המשוחרר כתבנית לתגובת PCR.
2× PCR קלTMלמיקס יש סבילות חזקה למעכבי תגובה PCR, והוא יכול להשתמש בליזט של הדגימה לבדיקה כתבנית להגברה יעילה וספציפית.מגיב זה מכיל Foregene D-Taq DNAPolymerase, dNTPs, MgCl2, חוצץ תגובה, מייעל PCR ומייצב.
D-Taq DNA פולימראז הוא פולימראז DNA שפותח במיוחד על ידי Foregene לתגובות PCR ישירות.ל-D-Taq DNA פולימראז יש סבילות חזקה למגוון מעכבי תגובת PCR, והוא יכול להגביר ביעילות כמויות עקבות של DNA במערכות תגובה מורכבות שונות, ומהירות ההגברה יכולה להגיע ל-2Kb/min, מה שמתאים במיוחד לתגובת PCR ישירה.
מפרטים
50×20µl rxns, 200×20µl rxns, 500×20µl rxns, 2000×20µl rxns
רכיבי ערכה
חלק א' | Buffer AL |
Foregene Protease | |
6× מאגר טעינת DNA | |
חלק שני | 2× PCR קלTMלְעַרְבֵּב |
תכונות ויתרונות
■ללא טיהור DNA שגוזל זמן ויקר
■ הביקוש לדגימה קטן, ניתן לבדוק רק 5 מ"ג של רקמה של בעלי חיים.
■ אין צורך בטיפול מיוחד כמו טחינה וריסוק והתפעול פשוט.
■ מערכת PCR אופטימלית גורמת ל-PCR סגוליות גבוהה יותר וסובלנות חזקה יותר למעכבי תגובה PCR.
פרמטרים של ערכה
יישום: מגוון רקמות של בעלי חיים.
DNA ששוחרר מתמוגגת דגימה: משמש רק כתבנית PCR.
ניתן להשתמש בערכה למטרות הבאות: זיהוי טרנסגנוזיס, גנוטיפ של בעלי חיים וכו'.
זרימת עבודה
אחסון וחיי מדף
יש לאחסן את חלק I של ערכה זו ב-2-8℃.
ניתן לאחסן את המגיב Buffer AL במשך 12 חודשים בתנאים יבשים;זה יכול להיות מאוחסן ב 2-8℃לאחסון ארוך יותר.
לריאגנט Foregene Protease יש נוסחה ייחודית.כדי להבטיח את פעילותו ויציבותו, נא לאחסן אותו ב-4℃למשך 12 חודשים.
מגיב 6×ניתן לאחסן מאגר טעינת DNA ב-4℃או -20℃במשך זמן רב.
יש לאחסן חלק II של ערכה זו ב-20-℃.
ריאגנט 2×PCR קלTMניתן לאחסן תערובת למשך 12 חודשים ב-20-℃;אם נעשה בו שימוש תכוף, ניתן לאחסן אותו גם ב-4℃לאחסון לטווח קצר (השתמשו בו תוך 10 ימים).